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Protocole pour une DAPI Stain

Protocole pour une DAPI Stain


DAPI représente le 4'-6-diamidino-2-phénylindole chimique, et il est utilisé pour colorer l'ADN double brin. Le composé forme des complexes fluorescents bleu avec des noyaux de cellules et ainsi est couramment utilisé pour mettre en évidence la structure des cellules. Le type et la densité de coloration peuvent également identifier les cellules mortes ou mourantes.

Préparation Solution DAPI

La solution de DAPI première doit être diluée dans une solution de travail. Par exemple, 10 mg du produit de Invitrogen DAPI doivent être mélangés avec 2 ml d'eau déminéralisée, puis dilué à une concentration de 300 nano- Molar (indications seront présents sur le produit) avec une solution saline tamponnée au phosphate (PBS).

Préparation de l'échantillon

Fixer l'échantillon correspondant au type d'échantillon à tester sur une lame. Ajouter 300 microlitres de la solution de travail DAPI à l'échantillon et incuber pendant une à cinq minutes. Rincer la lame avec du PBS.

en cours d'analyse

Utilisez un microscope à fluorescence pour regarder l'échantillon coulissant monté. Les noyaux DAPI colorées peuvent être identifiés par une fluorescence bleue.